1. 研究目的与意义
白介素12是由Kobagshi等在1989年首次报道,从EB病毒转染人B淋巴母细胞系的培养液中发现的,将其命名为NK细胞刺激因子(NKSF)。随后是由Hoffman研究小组从EB病毒转化的B细胞系NC37培养液中坚定到,并命名为细胞毒淋巴细胞成熟因子(CLMF)。[1]白介素12(interleukin12,IL12)作为其家族中一个重要的细胞因子,具有多种免疫活性,在机体早期的非特异性免疫和随后的抗原特异性免疫过程中均扮演重要角色。[2]同时白介素12是一种异源二聚体细胞因子,被认为是细胞免疫应答过程中的关键调节因子。IL-12能激活NK细胞、T细胞,并诱使其分泌大量IFN-γ,抑制肿瘤血管生成,对多种肿瘤的预防和治疗显示了良好的应用前景。[3]
顶空分析(Headspaceanalysis)的想法源于分析固体或液体顶部蒸气相中的有机挥发性物质。这种方法比气相色谱的产生还要早,其文献报道可以追溯到1939年Harger等人对水相中醇含量的测定。自气相色谱法产生50年来,如何进行样品的制备和采用何种有效的进样方法被一致认同为是气相色谱成功分析的关键因素。气相色谱适用于分析挥发性和半挥发性的化合物,所以顶空分析不但可以作为独立的一种样品处理技术,,也是一种非常适合与气相色谱进行联用的分析方法。顶空-气相色谱联用的报道最早见于1958年。顶空分析专一性收集样品中易挥发的成分,与液-液萃取和固相萃取方法相比这样既可以避免在除去溶剂时引起挥发性物质的损失,又降低了共提取物所引起的噪音,这使得顶空分析方法相对于溶剂提取方法对样品中微量的有机挥发性物质分析具有更高的灵敏度和更快的分析速度。顶空分析可以直接得到样品所释放出的气体的化学组成,因此顶空分析法在气味分析方面有独特的意义和价值。顶空分析方法随着气相色谱分析方法的发展也在不断更新和发展,尤其是近十年来对环境、食品及药品中挥发性有害物质的关注,使得顶空分析这一传统的分析方法再度成为分析化学工作者关注的热点。顶空分析法在分析过程中无需采用有机溶剂进行提取,大大减少了对分析人员和环境的危害,是一种符合绿色分析化学要求的分析手段。[4]
异丙醇是无色透明具有乙醇气味的可燃性液体,是重要的化工产品和原料,主要用于制药、化妆品、塑料、香料、涂料等。异丙醇沸点82.4℃,相对密度0.7855g/cm3,能以任何比例与水混合,也溶于醇、醚、苯、氯仿等多数有机溶剂。异丙醇属于微毒性污染物,排入地表水中会造成环境的二次污染。[5]本实验是利用IL-12中异丙醇顶空气相色谱法验证的数据结果来验证所涉及的方法是否可行。采用顶空自动进样器,DB-624毛细管色谱柱测定。
2. 课题关键问题和重难点
标准溶液5次进样,异丙醇,正丙醇的峰面积RSD%不得过2%。各溶剂峰的分离度不得低于1.5。应确定潜在杂质对异丙醇检测无干扰
3. 国内外研究现状(文献综述)
气相色谱法概述
色谱法是一种分离技术,这种分离技术应用于分离化学中,就是色谱分析。它以其具有高分离效能、高检测性能、分析时间快速而成为现代仪器分析方法中应用最广泛的一种方法。它的分离原理是使混合物中各组分在两相间进行分配,其中一相是不动的,称为固定相,一相是携带混合物流过此固定相的流体,称为流动相。当流动相中所含混合物经过固定相时,就会与固定相发生作用。由于各组分在性质和结构上的差异,与固定相发生作用的大小、强弱也有差异,因此在同一推动力作用下,不同组分在固定相中的滞留时间有长有短,从而按先后不同的次序从固定相中流出。这种借在两相间分配原理而使混合物中各组分分离的技术称为色谱分离技术或色谱法。[6]
顶空分析概述
4. 研究方案
制备空白溶液内标液标准储备液标准溶液供试品溶液和标准工作液
注入空白溶液一针,再注入标准溶液5针,检查系统适用性
分析方法验证参数
5. 工作计划
第二学期
第16-18周确定毕业论文题目,查阅相关文献资料,熟悉公司工作流程以及部门标准操作规程,并进行理论和技能培训。
第19周初步确定研究方案。
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