1. 研究目的与意义
herg是心肌细胞上存在的一种钾离子通道，如果通道被化合物（药物）阻断，则会引起尖端扭转性室心律失常（TDP），最终导致猝死。
曾经有几种药物，例如，治疗过敏的Terfenadine（特非那定），治疗胃动力的Cisapride（西沙必利）等因阻断了herg通道，被迫撤市。
此课题的目的就是利用膜电位染料建立herg稳定细胞系，用于候选化合物的心脏毒性检测（conpund是不是阻断通道），为了减少有心脏毒性药物可能上市，减少猝死病例的发生。
2. 课题关键问题和重难点
1、实验室复苏293T细胞（即由293细胞的派生，同时表达SV40大T抗原细胞，）时需要全程的无菌操作，以防在实验最初细胞就被污染掉。
2、不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。
3、转染时，一定要把PEI DMEM加入到质粒 DMEM中，顺序不可错，轻微混匀，静止20 min。转染后4小时，一定要换液，换含有FBS的完全培养液，因为PEI对细胞毒性太大。如果后续试验涉及到稳定筛选，建议把血清浓度适当提高。
3. 国内外研究现状（文献综述）
1、HERG
HERG基因编码的钾离子通道存在于人类心室和心房肌细胞中, 其HERG通道编码心脏快速延迟整流钾电流IKr, 为心肌细胞动作电位三相复极期的主要外向钾电流, 在心脏动作电位复极化过程中发挥着重要作用。此外,快速延迟整流钾通道(IKr/HERG通道)是III 类抗心律失常药物的作用靶点, 被某些药物作用时, 会引起长QT 间期综合征(LQTS), 进而导致尖端扭转性室性心动加速(TdP, Torsade depointes), 甚至猝死。 因此, 药物通过阻滞HERG 通道产生心律失常的不良反应已成为药物开发中一个必须考虑的问题。
药物从研发到上市的过程非常漫长, 其中很多化合物因为药物吸收、分布、代谢、排泄及毒性(ADMET)性质不佳而被中止开发, 给制药企业造成巨大的经济损失。目前很多公司运用高通量筛选的方法和虚拟ADMET预测的方法以降低药物研发后期的风险性。具有HERG 阻滞活性的部分药物, 其化学结构具有多样性, 如能借助计算机模拟技术对新化学实体是否具有致心律失常的不良反应进行有效的预测和筛选, 这将为新药的设计和研究中避免心律失常的不良反应产生指导作用。
4. 研究方案
本课题拟采用的研究思路如下：
1、 向293t细胞中转入herg质粒
2、 向转入质粒的细胞转移至10cm dish 并加入G418抗体，进行培养。
5. 工作计划
第一学期
第16-18周 确定毕业论文题目，搜集并阅读与所选课题相关的资料。
第19周 查找相关文献，完成外文翻译。
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
