碱性磷酸酶检测试剂盒的制备研究开题报告

 2022-10-17 09:45:57

1. 研究目的与意义

随着生活水平的逐步提高,对疾病的诊断需求越来越多。

近年来,人们的体检率升高了20%-30%,所以体外检测试剂需求越来越多,体外监测试剂具有检测方便的优点,而本课题对一种体外生物检测试剂的制备进行研究。

碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中,其中以肝脏为最多其次为肾脏,骨骼、肠、和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。

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2. 课题关键问题和重难点

(一)、课题关键问题1、碱性磷酸酶检测试剂的空白吸光度(光径1.0cm,波长405nm)≤1.0。

2、制备出的检测试剂的线性范围必须在10-750U/L,线性相关系数r≥0.990。

3、碱性磷酸酶检测试剂盒的相对偏差应不超过10%,保证产品的准确度。

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3. 国内外研究现状(文献综述)

碱性磷酸酶是非特异性磷酸单酯酶, 可以催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应, 生成无机磷酸和相应的醇、酚、糖等, 还可以催化磷酸基团的转移反应。

最适pH为7.6-9.9,ALP定位于生物膜,为基质小泡和质膜的标记酶。

ALP存在于除高等植物外几乎所有的生物体内, 可直接参加磷代谢 ,在钙、磷的消化、吸收、分泌及骨化过程中发挥了重要的作用。

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4. 研究方案

首先选定课题,之后进行资料的搜集,一共拟定了四种方案。

方案一:ALP-R1的配制原料为水、4mol的氯化氢、AMP缓冲剂、NaN3R2的配制原料为AMP缓冲剂、EDTA、七水合硫酸锌、四水乙酸镁、NaN3方案二:ALP-R1的配制原料为水、AMP、EDTA、七水合硫酸锌、四水乙酸镁R2的配制原料为纯化水和PNPP之后将方案一、二的R2试剂配方互换,一共可以拟定四种实验方案,最终将它们的线性、精确度以及稳定性进行比对,最终选出最优方案。

5. 工作计划

第一周:拟定毕业设计课题。

第二周:收集资料,了解课题及主要内容,撰写开题报告。

第三周:查找外文文献并且翻译外文文献,完成开题报告。

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