胱氨酸蛋白酶抑制剂C试剂盒的研制开题报告

 2022-10-17 09:45:58

1. 研究目的与意义

CYS-C校准品与本公司CYS-C检测试剂盒配套使用,用于临床检验实验室CYS-C目定量检测的系统校准。

样品中胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CYS-C)与试剂中抗人CYS-C抗体胶乳颗粒发生凝聚反应,凝集反应形成抗原抗体复合物而产生浑度,其浑度高低在一定量抗体存在时与样品中CYS-C成正比。

在546nm处通过测定特定波长的吸光度值,参照校准曲线即可计算出血清中CYS-C的含量。

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2. 课题关键问题和重难点

胱氨酸抑制剂CYS-C的制备采用胶乳增强免疫比浊法,关键问题及难点其一在于包被的胶乳液,影响包被的胶乳液吸光度的主要有三个变量,所选胶乳的粒径和用量,所加抗体种类用量;以及活化计的选择及用量;包被胶乳过程还要注意摇床时间,摇床时的温度。

包被乳胶也涉及到乳胶液的超声处理,在超声处理中要不断改善超声处理时间。

其二在于R2即储存液的配制,要通过检测来选择合适的封闭剂如(吐温,BSA)和保护剂(海藻糖,蔗糖)。

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3. 国内外研究现状(文献综述)

半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C 在体内存在广泛,是体内的一种蛋白质 成分,近年研究发现它对人体作用广泛,有些研究认为可以把它作为 肾功能早期损伤的指标,在神经系统方面研究认为半胱氨酸蛋白酶 抑制剂 C 对脑血管淀粉样变性有影响,也有研究认为半胱氨酸蛋白 酶抑制剂 C 引起脑血管淀粉样变性是脑中风的影响因素,是脑出血的 危险因素。

也有研究认为半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C 是 Alzheimers disease 的迟发危险因素,由脑血管淀粉样变性引起,但具体机制仍 有待进一步研究。

参考文献:血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平与脑梗死的关系及其影响因素的探讨 刘存杰半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C,Cys C)又称胱 抑素C, 是二十世纪60 年代研究发现的一种广泛分布于动 物、植物和原虫生物中低分子量蛋白质,具有能从肾小球自 由滤过,不被肾小管重吸收和分泌的优点, 并且肾脏是其唯 一排出器官[1]。

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4. 研究方案

首先,确定好毕业设计的题目选择,根据自己查找文献资料进行了解该试剂对现在医疗检验的用途以及临床意义。

该项目由试剂R1和试剂R2组成,其中试剂R2为主要研究对象,试剂R2的主要研究思路为:根据上述的设计方法不断摸索、调试,制备成我们最后所需的胶乳试剂。

然后样本中的CYS-C与我们所制成的试剂中适量的胶乳颗粒交联的CYS-C抗体结合,形成不溶性的免疫复合物,使反应液吸光度改变,在抗体量一定的条件下,吸光度改变的大小与人血清样品中CYS-C含量成正相关。

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5. 工作计划

1.确定毕设题目2.查找并了解其制备方案及注意事项。

3.学习使用操作与该方案有关的仪器使用及维护。

4.开始制备并取小样使用AU480仪器检验,对检验结果进行分析,适当改变原方案条件及配方筛选出最佳方案。

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