1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
1.人工烟酰胺辅因子研究现状:1936 年,Karrer 等发现 NAD(P)H 的吡啶环在酶促反应中被还原,因此一系列全合成 1, 4-二氢吡啶环模型物被开发出来。
1955 年,Mauzerall 等通过同位素示踪技术,跟踪 BNAH 和天然烟酰胺辅因子还原品绿的反应,揭示了烟酰胺辅因子的氢转机制:即直接发生在还原型烟酰胺吡啶环上 C4位,证实 mNADHs 可以作NAD(P)H的模型物。
Kaplan 等利用 NAD 酶(NADase)催化3-酰基取代的吡啶类似物和 NAD(P) 反应,得到结构相对上述 1,4-二氢吡啶类似物更为保守的半合成mNAD s。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
研究内容:以不同类型的羟基胺或者胺为底物,经过溴化后与烟酰胺缩合,得到多种不同的氧化型N-取代的氨基辅因子,之后经过还原得到还原型辅因子。
对重组w-转氨酶菌株进行培养表达纯化,得到纯化的w-转氨酶。
分别测定氧化型、还原型人工辅因子的供胺能力。
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