1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
马链球菌是一种革兰氏阳性菌，能引起多种动物患病的条件致病菌。该菌是猪链球菌病的一种重要致病菌。人与患病动物接触也可能会导致侵袭性感染如脑膜炎，败血症等。1975年四川省曾爆发该菌所致的链球菌病，导致300000头猪死亡，造成巨大的经济损失，更加引起人们的重视。
Sortase酶（分选酶）,是一种一种抗革兰氏阳性致病菌新型靶酶。大量的研究报道发现革兰氏阳性细菌菌毛生物合成共性的机制，菌毛基因群都是由分选酶基因和菌毛蛋白基因组成，由分选酶通过转肽反应将各单体菌毛蛋白连接成聚合体并锚定在细胞壁肽聚糖上，最终形成长丝状菌毛结构。菌毛在多种病原菌的黏附、细胞侵入、宿主免疫逃避等方面起关键作用，是重要的致病因子。由于许多革兰氏阳性菌的表面蛋白是经过分选酶的作用而锚定到细胞壁上,表面蛋白在病原菌的致病性方面又能起关键作用,如果阻断这个由分选酶介导的锚定过程，革兰氏阳性菌就无法表现出强烈的致病性并很容易被机体免疫系统所识别，分选酶有可能成为降低革兰氏阳性菌致病性的药物靶点。本实验表达SrtC蛋白以研究该蛋白的特性和作用，构建SrtC缺失株与野毒株做比较分析，确定其对于细菌致病性的作用并为新型药物、疫苗的研发做铺垫。
自从 Mazmanian 等于 《科学》杂志上发表有关金黄色葡萄球菌分选酶的文章以来，国外很多研究者在分选酶，尤其是金黄色葡萄球菌分选酶 (SrtA) 方面做了大量的基础研究工作。有实验表明， 当对许多革兰氏阳性菌进行 SrtA 基因敲除实验后发现， SrtA 的缺乏使病原菌无法正常地将表面蛋白锚定到细胞壁上, 从而很大程度降低了病原菌的致病性。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：
1马链球菌35246中SrtC蛋白的原核表达
2马链球菌35246中SrtC缺失株的构建。
3. 研究的方法与方案
原核表达：
1目的片段扩增,双酶切
2将目的片段连接到质粒,构成载体
4. 研究创新点
关于马链球菌近几年才得到关注，研究相对较少。然而马链球菌能引起多种动物患病，人与患病动物接触也可能会导致侵袭性感染如脑膜炎，败血症等，我国已有大规模爆发的先例，造成重大经济损失。
分选酶发现短短十余年，除了对SrtA有一定研究，该家族其他酶的具体性质、功能都尚未得到实验确认。对于SrtC酶的研究将弥补分选酶研究目前的空白，为以后进一步的研究打下良好基础，为研发新型抗菌药物和疫苗提供新的依据。
5. 研究计划与进展
2014.2.24-2014.3.1 收集资料，了解背景，完成实验方案的设计和方法的熟悉
2014．3.2-2014.3.25 完成SrtC蛋白载体的正确构建
2014.3.26-2014.4.5 完成SrtC蛋白的诱导表达以及蛋白的纯化
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
