高效液相色谱串联质谱同时检测9种霉菌毒素方法的初探开题报告

 2023-02-15 10:13:35

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

意义

近年国内外食品和饲料以及原材料被霉菌毒素污染很普遍。霉菌毒素的污染可能导致急性中毒或对人体和动物的健康造成长期负面影响。同时受污染的食物和饲料对国内外贸易造成了巨大的经济损失。 近年来国内外开发了多种同时检测饲料中多种霉菌毒素的方法,但是检测宠物食品中霉菌毒素的方法甚少。宠物食品中多数含有鱼粉、油脂、脂肪酸、羊肉、鸡肉等成分,为宠物提供完整及均衡的营养。宠物食品中的这些成分与大动物饲料(其成分为:小麦、大豆及动物副产品等)有所不同。现在人们与宠物的关系越来越密切,甚至当做家庭成员看待,所以对宠物食品的安全也越来越看重,因此建立同时检测宠物食品中多种霉菌毒素的方法对保障宠物食品安全具有十分重要的意义。

国内外研究概况

E M Binder 介绍了对全球范围内商品饲料和饲料原料中真菌毒素的调查。目的是评估一些畜牧主产区的饲料和饲料原料中的真菌毒素导致的发病率。检测了镰刀菌毒素,包括脱氧瓜蒌镰菌醇、T - 2 毒素、玉米赤霉烯酮、伏马毒素B1、B2 和B3,同时还检测了非镰刀菌毒素,包括赭曲霉毒素A 和黄曲霉毒素B1。分析了欧洲和地中海市场的1507 个饲料样品的2753 个项目,分析了亚洲和太平洋地区的1291 个样品6391个项目,结果显示,超过50% 的欧洲饲料样品污染物含量高于方法定量限,亚洲太平洋地区三分之一的样品检测为阳性。欧洲饲料样品中真菌毒素主要有脱氧瓜蒌镰菌醇、玉米赤霉烯酮和T - 2 毒素,而亚洲和太平洋地区则主要是脱氧瓜蒌镰菌醇、玉米赤霉烯酮、伏马毒素和黄曲霉毒素[5]。由于国内外普遍都有霉菌毒素的污染,相应的对其检测方法也有很多研究,如ELISA,TLC,HPLC等等,而色谱串联质谱检测也是一种很有效的检测方法,研究颇多,现欧盟对饲料和谷物中的7种毒素给出了检出标准,而国内的研究较少。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标

本研究的目的是开发一种快速、可靠的方法,使用快速,简便,便宜,有效,稳定和安全,无需任何净化步骤的提取方法,并使用高效液相色谱串联质谱同时分离和检测9种霉菌毒素:AFB1,AFG1,ZEN,DON ,桔青霉素(Crtrinin),T-2,OTA,FB1、白僵菌毒素(BEA)。

研究内容

本课题研究的主要内容就是摸索出9种毒素各自的质谱检测条件和同时分离9种霉菌毒素的液相检测条件,并且确定其检测的检出限和定量限,由此来建立高效液相串联质谱同时检测9种霉菌毒素的方法。

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3. 研究的方法与方案

研究方法

关于建立检测毒素的液相条件,色谱柱的选择有4.6150mm、3.0100mm、

2.1150mm三种;流动相A的选择有甲醇、乙腈,流动相B的选择有5mM的乙酸铵含0.1%的甲酸水溶液、5mM的乙酸铵含0.5%的甲酸水溶液;流速的选择有0.2ml/min、0.25ml/min;混合标准工作液的浓度0.5g/ml、1g/ml。根据这些已有条件进行组合检测毒素的响应,由响应程度的高低来确定液相色谱检测这些毒素的最优条件[2]

关于建立检测毒素的质谱条件,根据文献查阅得到其各自检测的正负离子模式,然后再做相应的调整,接着摸索得到最优母离子的碎裂能和母离子打碎成两个子离子的碰撞能。

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4. 研究创新点

特色或创新之处

本课题的研究是建立高效液相色谱法串联质谱同时检测9种霉菌毒素的一种方法,可快速准确的检测物质里是否含有这些毒素,后期可应用于实际样品,需要适当的样品前处理,然后通过本方法的检测即可得出样品中是否有毒素,为检测饲料、谷物甚至动物尿液中毒素残留提供的新思路。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

1.查阅文献,了解相关信息 2017.2.10-3.1

2.毒素质谱检测条件的建立 2017.3.2-3.22

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