1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
一．本课题意义：
猪伪狂犬病（PR）是由伪狂犬病毒（PRV）引起的包括多种家畜和野生动物发病的一种急性、烈性传染病，猪是该病毒的天然宿主，贮存者和传染源[1]。猪感染的症状因日龄而异，仔猪常表现高热，食欲废绝，呼吸困难，流涎，抑郁震颤等症状，继而出现运动失调，间接性抽搐，昏迷已至死亡，15日龄仔猪死亡率可高达100%，断奶仔猪死亡率在10%-20%，肥猪表现为增重减慢等轻微症状，母猪表现为返情，屡配不孕，妊娠母猪表现为流产，产死胎和木乃伊胎[2]，公猪则发生睾丸肿胀，萎缩等，利用性能降低或丧失。该病具有高度传染性，易在猪群间不断传播。给养猪业造成巨大的损失。因无有效药物用于伪狂犬病防治，对其控制主要依赖疫苗的免疫接种。伪狂犬病毒可以在猪中通过猪体多次传代能使毒力增强[3]。猪群感染伪狂犬病后康复畜群虽恢复正常生产，而种畜群却为隐性感染，应激可以重新激活隐性感染，使猪群表现出临床症状，造成经济损失,国外一些专家认为，PR给养猪业造成的损失仅次于猪瘟和口蹄疫[4]。
一些伪狂犬野毒阳性猪场，伪狂犬病发生于疫苗免疫猪群，一些阴性猪场变成阳性，猪场母猪带毒问题普遍，部分猪场中猪群gE转阳无明显临床症状。部分阴性猪场转阳从育肥猪开始，或者引进阳性种猪导致伪狂犬爆发或转阳[5]。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标、内容和拟解决的关键问题
一．研究目标：
1对南京部分地区规模猪场已免疫猪群的观察，初步判断有无PR病变临床症状。
3. 研究的方法与方案
1归纳总结相关文献资料找出可能的问题并寻找解决的方案，制定实验设计
2通过病料收集处理获得病毒基因的来源
3应用PCR以及电泳试验来检测野毒，从而进行分析统计
二．技术路线
寻找与PRV野毒测定的相关文献 |
在查阅文献的基础上规划整个毕业设计，并由指导老师完善 |
目标动物的疫苗接种 |
目标动物脏器样本的检查及相关指标的测定 |
↓
提取病毒DNA进行PCR确定性检验 |
PCR处理及电泳试验检测野毒 |
对阳性株进行同源测序 |
撰写论文 |
三．实验方案
1查阅文献，了解实验过程所需的解决问题，寻找解决方法。
2对已免疫接种PRV疫苗的猪群进行严格管理，在免疫相关规定时间之后取其相关组织脏器(脑，肺，脾，死胎等)观察病理变化并且进行处理。
3对处理后的样品进行病毒DNA提取，PCR处理，电泳实验检测阳性目标，统计。
4将胶回收切割送检，进行同源测序。
5回馈猪场，制定防控计划
四，可行性分析
1猪伪狂犬病的防治主要依赖疫苗接种，因此，对接种后疫苗的保护效力进行检验是必要的
2通过专业课程所掌握的理论基础以及文献的查阅可确保实验的顺利进行
3有较为完善的实验室条件及相关老师的指导可保障研究的科学合理性。
4 PCR方法是一种可靠的分子生物学诊断技术，相比于血清诊断技术他能有效区分疫苗毒和野毒。
4. 研究创新点
鉴于以往对接种PR疫苗的猪场的检出伪狂犬野毒感染不在少数的情况，说明部分猪场的免疫程序不能满足当前猪伪狂犬病防控的需要。该研究通过对猪场猪伪狂犬病野毒变异检测分析，可反映出接种的疫苗的保护效力，并且能为这些猪场免疫程序的改善提供科学依据，帮助其选择科学的免疫方案，以保证猪群有足够的免疫力。
5. 研究计划与进展
1.2016年9月至9月下旬，收集资料，回顾相关知识，查阅相关文献，熟悉实验环境。
2.2016年10月至11月下旬，按照设计进行实验，整理研究数据。
3.2016年12月至12月中旬，完善毕设初稿，迎接中期检查。
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