1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
研究意义传染性法氏囊病（Infectious bursal disease, IBD）是危害世界养禽业的主要传染病之一。
是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)引起的一种急性、高度接触性传染病，该病的发病部位主要在雏鸡的中枢免疫器官―法氏囊，造成免疫抑制，给养鸡业造成了巨大的经济损失。
（1）该病于20世纪50年代首次发病于美国，在20世纪80年代在欧洲国家报导了超强毒株和变异株的出现，（2）该病的发生于流行不断出现新的特点，这给该病的诊断与防治带来了更多的困难，深入研究其致病机理，对该病的防控具有十分重要的意义。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标构建原核表达IBDV VP1载体，诱导表达His-VP1蛋白，纯化获得His-VP1蛋白；研究内容以南京农业大学免疫研究所保存的pCIneo-VP1质粒为模板，将全长VP1亚克隆至Pet28a载体中，获得Pet28a-VP1重组表达质粒，将Pet28a-VP1重组质粒导入到表达菌BL21里面，利用IPTG诱导剂在恒温条件下诱导表达His-VP1蛋白，经过镍柱纯化获得较纯的His-VP1蛋白，为后续实验的开展提供纯度高的重组蛋白。
拟解决的关键问题获得Pet-28a-VP1重组质粒；诱导表达出His-VP1蛋白，纯化获得His-VP1蛋白
3. 研究的方法与方案
研究方法：引物设计；VP1定向克隆，构建Pet28a-VP1重组质粒；诱导表达；摸索最佳表达条件，如IPTG浓度、表达温度、表达菌等；镍柱非变性纯化His-VP1蛋白。
技术路线及实验方案：设计引物构建Pet28a-VP1重组质粒导入BL21表达菌IPTG诱导表达Pet28a-VP1优化表达条件，提高表达量及促融表达镍柱填料纯化获得His-VP1蛋白
4. 研究创新点
特色或创新之处获得Pet28a-VP1重组表达质粒，并导入到BL21系列表达菌；②经过优化表达条件，实现His-VP1的高效表达，并纯化获得His-VP1蛋白。
5. 研究计划与进展
研究计划针对Pet28a载体设计VP1特异性定向克隆引物，经过PCR、酶切、连接、转化、挑取阳性克隆，送测序等构建出Pet28a-VP1重组质粒，并导入到BL21系列表达菌，在不同浓度的IPTG、不同温度条件实现优化His-VP1的诱导表达，最后经过镍柱填料纯化获得His-VP1蛋白。
预期研究进展：2016.101.设计VP1定向克隆引物；2.构建Pet28a-VP1重组质粒并导入到BL21系列表达菌里面；2016.111.初步探索His-VP1的表达量；2.摸索表达条件实现促融上清表达；3.非变性镍柱纯化得到His-VP1蛋白。
2016.12 结束实验并进行中期考核2017.1-2整理实验数据2017.3-4准备答辩
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