1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
随着养殖业的发展，越来越多的抗菌药物在临床中被应用，细菌出现耐药性的现象也越来越普遍，不仅会影响治疗效果，也会在动物体内产生兽药残留，进而通过生物链进入人体，造成公共卫生安全问题。
据统计，中国每年生产21万吨抗菌药，半数以上为兽用抗菌药[1]。
大肠埃希菌（Escherichia coli），为革兰阴性兼性厌氧杆菌，作为肠道共生菌，其在特定条件下可以致病。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标、内容：本实验从江苏宿迁、徐州等地区的猪场进行采样，健康猪采鼻拭子，对病猪进行剖检取组织样品。
通过在选择培养基培养、革兰染色、生化实验和PCR鉴定等方法分离大肠杆菌，同时参考CLSI推荐的药敏试验方法测定不同抗菌药对大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC），根据CLSI规定的各药耐药折点计算耐药率，分析不同猪场的耐药情况。
拟解决关键问题：了解临床中大肠杆菌耐药现状，根据调查结果为不同猪场提供用药指导。
3. 研究的方法与方案
研究方法：本实验所采的菌株来自于江苏省宿迁、徐州等地的猪场。
主要的步骤包括：一、样品采集1、健康猪主要采集鼻拭子，每头猪尽量在鼻腔深部不同位置采集三次，采样时要用无菌的PBS浸湿棉签，棉签头剪断置于无菌的2mlEP管中。
2、对病猪，最急性和急性病例可无菌采集死亡猪的心、肝、肺、肾、脾脏、脑、淋巴结等组织，剖开后用无菌手术刀切下一部分脏器，用消毒过的镊子放入无菌的10mlEP管中。
4. 研究创新点
由于各地区大肠杆菌流行情况，用药情况，耐药情况各不相同，因此在为猪场提供参考用药时，不能仅依赖文献进行选择。
本实验从当地猪场进行采样，临床分离出菌株，进行药敏实验，选择合适的药物，为大肠杆菌病的防治用药提供参考。
5. 研究计划与进展
2016.10.18 第一次采样2016.10.19-2016.10样品的扩增以及第一次平板纯化2016.10.24-2016.10第一次纯化菌株进行染色，PCR，以及生化鉴定2016.11.1-2016.11分离菌株的保存以及第二次的纯化培养2016.11.6-2016.11MIC测定2016.12.21第二次采样2016.12.22-2017.01 样品扩增，平板纯化2017.02.01-2017.02 分离鉴定2017.03.18第三次采样2017.03.18-2017.04 分离纯化因为样品较多，且采样不止一次，采样后进行的鉴定项目可以同时交叉进行
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
