1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
意义:
猪链球菌(Streptococcus suis,S. suis)是一种重要的人兽共患病病原菌,可感染猪等多种动物和人,具有很强的致病性。根据其荚膜多糖抗原特性的差异可分为35个血清型(1~34型及1/2型),其中血清2型呈全球性分布,为最常见致病血清型。猪链球菌2型(SS2)感染可引起猪的脑膜炎、关节炎、心内膜炎和败血症等,是影响全世界养猪业的重要传染性疾病之一。另外SS2也可感染与养猪产业密切接触的人群,引起人的脑膜炎、心内膜炎、耳聋和运动功能紊乱等症状,甚至急性死亡[1]。1998年和2005年,在我国江苏、四川省分别发生了2次猪感染人事件,表现为链球菌中毒性休克(streptococcal toxic shock syndrome,STSS)的暴发流行,引起国内外对SS2感染导致公共健康问题的广泛关注[2]。
细菌粘附和侵袭是细菌感染宿主的首要关键步骤[3, 4]。且菌毛是致病菌与宿主细胞相互作用的重要功能结构,在介导细菌黏附、定殖、侵袭和诱导宿主免疫应答等方面发挥重要作用[5, 6],因而有学者认为菌毛是细菌表面重要的毒力因子。
2. 研究的基本内容和问题
(一)研究目标:
分析并定位猪链球菌2型ZY05719中的srtBCD基因簇中的疑似菌毛结构基因sbp4的基因序列,设计引物、表达并纯化出SBP4蛋白,再利用Western Blot技术分析鉴定其免疫原性,也为研发猪链球菌的亚单位疫苗奠定基础。
(二)研究内容:
3. 研究的方法与方案
(一)研究方法:
引物设计、原核表达、蛋白纯化及western-blot技术。
(二)技术路线:
4. 研究创新点
四、特色或创新之处
1、目前,国内外虽然有猪链球菌2型疑似菌毛结构基因的的相关研究,但对菌毛相关菌毛结构基因sbp4基因的研究报道较少。
2、通过western-blot对表达纯化出的猪链球菌似菌毛结构基因sbp4基因进行克隆表达,对于后续蛋白相互作用及对致病机理的研究有重要的作用。免疫原性的分析,也为研发猪链球菌的亚单位疫苗奠定基础。
5. 研究计划与进展
五、研究计划及预期进展(一)研究计划:
1、1个月:查阅有关猪链球菌2型疑似菌毛结构基因的的相关研究的文献,自行设计引物并合成。学习并熟悉相关实验方法,准备好实验中所需的器材和试剂。
2、25天:PET-28a-sbp4重组表达载体的构建。
以上是毕业论文开题报告,课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。