苏淮猪耐粗饲的肠道微生物特征初步解析开题报告

 2023-02-11 12:59:52

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

猪胃和小肠不能产生降解日粮纤维的酶,消化吸收粗纤维主要通过其大肠中微生物如黄化瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)、白化瘤胃球菌(Ruminococcus albus)和产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)等的降解作用来实现[1]。大肠内微生物,尤其是纤维分解菌分泌纤维素酶复合体,将纤维作为发酵底物,水解纤维素聚合体,产生单糖或寡糖,再经发酵产生乙酸、丙酸和丁酸等挥发性脂肪酸(volatile fatty acids, VFA),最终被机体吸收利用,其中结肠中VFA可为生长猪提供5-28%的能量来源[2]

影响猪对粗纤维消化吸收的因素众多,其中品种是关键因素之一。大量研究发现,古老的地方猪种,如越南南非Mukota猪[3]、中国的梅山猪[4] [5]和淮猪[6]等,与现代高度商业化的瘦肉型猪种相比,对不可溶性高纤维水平日粮表现出更强的粗纤维消化能力

苏淮猪是1998年开始,利用含有淮猪血缘的新淮猪与瘦肉型大白猪杂交选育而成的的新品种。苏淮猪既保留了淮猪的耐粗饲、抗病力强的特性,又吸纳了大白猪生长快、瘦肉多的优点,且是节粮瘦肉型猪新品种。苏淮母猪的节能特点表现为在一个生产周期(空怀、怀孕、哺乳=164d)内,用较低的消化能(DE)(只有瘦肉型母猪饲养标准的86.06%)饲养,仍能正常生长和产仔。一头母猪一年节省的饲料能量相当于117.6kg玉米。因此苏淮猪推广可为解决我国粮食安全问题,发展节粮型养猪业提供重要支撑。然而目前苏淮猪耐粗饲的肠道微生物机制尚未清楚,系统研究以苏淮猪耐粗饲的机理,可为解析我国地方猪种耐粗饲机理奠定基础,为培育具有耐粗特性的新猪种提供理论依据。

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2. 研究的基本内容和问题

1研究的目标

探明苏淮猪肠道内纤维分解相关微生物群落丰度、力求鉴别其中高纤维消化率相关的关键性功能微生物,从微生物学角度进行纤维消化率差异与微生物丰度的相关性,初步分析高纤维消化率的个体是否是因为哪种纤维分解菌数量更多导致。

2研究内容

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3. 研究的方法与方案

1、研究方法(1)选择粗纤维消化率最高的10头猪的粪样中提取DNA、最低的10头猪的粪样中提取DNA(2) 研究黄化瘤胃球菌、白化瘤胃球菌等微生物的丰度(3)做纤维分解菌定量、高低消化率组纤维分解菌差异分析2、技术路线选择健康纯种苏淮育肥猪一相同基础日粮饲喂一空腹四小时全部屠宰一采集肠道内容物一DNA提取一微生物分析一特定微生物定量一微生物丰度与纤维消化率相关性分析3、 关键实验方案:研究黄化瘤胃球菌、白化瘤胃球菌等微生物的丰度,PCR扩增产物进行电泳切胶回收、纯化。

将纯化后的PCR产物与PMD19-TVector载体,体系为DNA4L,pMD19-TVector1L,SolutionI5L,总体积10L,16℃金属浴3h。

将连接反应体系加入到100L感受态细胞D5Hα中,热击转化后放置于37℃摇床振荡45min左右;吸取10L混液加入到含有氨苄抗性的LB固体培养平板,均匀涂板,置于37℃摇床上培养24h,至长出白色菌斑。

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4. 研究创新点

研究耐粗饲的肠道微生物机制,可为可以改变饲料类型,开发利用一些没被利用的廉价饲料,减少浪费和污染,缓减农业资源的供需矛盾。

5. 研究计划与进展

2015年5月2015年6月:阅读相关资料(文献和书籍) 2015年6月2016年3月:购买试验与耗材,进行样品分析和试验分析 2016年3月:申报课题,提交开题报告 2016年4月:整理分析实验结果,总结材料,提交结题报告,形成论文 2016年5月:提交论文

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