1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
应激是当今世界不可避免的现象,会导致许多生理和心理的变化[1]。应激已报道对动物繁殖有不利影响,应激条件下,如感染、剧烈运动、营养不良诱发各种生殖疾病如不孕或生育,有缺陷的卵母细胞和随之而来的受胎率降低。生殖过程中的性行为,排卵,胚胎着床的表达,神经内分泌系统的控制。神经内分泌反应的改变,由于应激的结果可能会影响这些过程[2,3]。
应激(stress)这一概念最早由H.Selye提出,随后Wolf提出了完整的应激概念。是指机体在受到各种内外环境因素刺激时所出现的非特异性全身反应,20世纪70年代,Mason提出心理应激学说,用以解释一些心理疾病的产生机制[4]。应激可以由不同的生理、心理及综合因素引起。在研究中经常使用的是应激混合型,例如:束缚应激是一种生理和心理的应激,限制运动,将动物从其群体中分离出来,生理和神经内分泌的改变,适应压力和快速恢复[5]。下丘脑、垂体和肾上腺髓质是由下丘脑-肾上腺髓质系统分泌肾上腺素的。FFS作为应激的结果是被WalterCannon第一次提出的[6]。平衡是一个自适应的反应激活下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)保持应力在轴[5]。束缚应激和甲状腺功能减退会影响动物的睾丸功能。应激能明显抑制睾丸生精功能,降低睾丸大小和重量,抑制精子发生的各个阶段和成熟程度。以往的研究表明,束缚应激会降低血清睾酮的浓度[7]。目前常用的束缚应激造访模式是将动物置于圆柱形筒内,在筒身上有相对足够的呼吸孔,以便动物呼吸,筒底部有一孔,足以使动物尾部伸出进行自由活动。这种方式既将动物束缚于固定物中,达到束缚刺激的作用,也满足动物拥有一定的自由空间。此外,根据束缚刺激的时长,束缚应激可分为急性刺激和慢性刺激[8,9]。
束缚应激作为一种非损伤性刺激,与人类身心性疾病的过程有相似性,因而引起研究者的广泛关注并逐渐成为应激研究中的热点之一。近年的研究使人们对束缚应激有了更为深入的了解。但是束缚应激对机体的影响及其作用机理仍有诸多不清楚的地方[10]。本课题的研究有助于提供这方面的事实理论依据。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:研究束缚应激对雄性小鼠生殖的影响
研究内容:对小鼠进行一段束缚应激,一段时间之后进行宰杀,称量其睾丸重量,做睾丸组织的切片,观察束缚应激对小鼠生殖的影响。
3. 研究的方法与方案
研究方法和实验方案:
选用与小鼠体型大小相似的管子,将小鼠放在管子内,每天放几个小时,连续放十多天,然后宰杀,称重睾丸质量,做小鼠睾丸的切片,然后HE染色,观察精子的形态结构;采集小鼠的血液,测量体内各种激素水平。对组织进行免疫组化实验。
技术路线:附件
可行性分析:
实验室具备本研究所需的各种分析仪器设备,可为本研究的顺利进行提供条件保障和强有力的技术支持。实验主要采用血清激素浓度的放射免疫分析法、组织学分析法、统计分析法等多种分析方法提高了实验的可行性。
4. 研究创新点
①实验动物使用的小鼠成本不高且易于实验操作。
②目前束缚应激对甲减雄性小鼠生殖的影响鲜有报道。
③实验采用多种分析方法提高了实验数据的精确度使实验结果更具科学性。
5. 研究计划与进展
2015年9月2015年10月查阅相关文献,确定实验方案;
2015年11月2016年1月采用相关的分析方法处理小鼠;
2016年2月2016年3月整理分析实验数据,撰写开题报告和论文草稿;
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