碲化镉对雄性小鼠血睾屏障连接蛋白Claudin-11表达的影响开题报告

 2023-02-11 13:00:07

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

量子点(Quantumdots)又称半导体纳米微晶粒(Semieonduetornanocrystal),其组成是一种粒径在1~10nm之间的准零维纳米材料。根据其元素组成,量子点可分为IV族(如Si量子点)、III-V族(GaN等量子点)、II-VI族(ZnS，ZnSe，ZnTe，ZnO，CdSe和CdTe等量子点)、IV-IV族(SiC等量子点)和IV-VI族(PbSe等量子点)等[1]。量子点具有良好的荧光性和光化学稳定性。由于其独特的荧光特性，量子点已经广泛应用于荧光探针、药物筛选、医学成像、生物芯片等领域。随着量子点应用的日益广泛，其环境和人体暴露量也逐渐增加[1，2]。但最近的研究表明，量子点纳米材料已经明显影响了雄性小鼠和男性的生殖健康[3]。因此，对纳米碲化镉等量子点材料的毒性研究和评价也愈加紧迫。

目前关于量子点的毒性机制研究，主要集中在重金属元素离子的释放、氧化过程中，活性氧的产生以及活性氧自由基介导的氧化应激等方面。已有的报道多数是以细胞为实验模型，通过测定细胞存活率等评价其细胞毒性，对整体实验模型的研究较少。目前关于碲化镉对生殖的作用研究也较少[4]。近期有研究表明，碲化镉已经对睾丸组织产生了氧化损伤，且其损伤程度与染毒时间之间具有一定的时间效应关系[1]。也有研究表明，同样是量子点材料的硒化镉对精子质量也产生了不利影响[3]。

精子的正常发生需要血睾屏障、内分泌、免疫等多个系统的协调统一，其中任何一个环节的缺失均会导致精子发生异常，其中血睾屏障的作用极为关键[5，6]。在睾丸中，相邻支持细胞间的紧密连接组成血睾屏障(BTB)，而Claudin-11是支持细胞间紧密连接的基本组成蛋白，其表达及紧密连接的分布在鼠类中研究广泛[7]。

为探明碲化镉对血睾屏障的影响，揭示碲化镉对雄性小鼠的生殖毒理机制，本课题采用免疫组化方法和蛋白免疫印迹方法，研究碲化镉对雄性小鼠血睾屏障连接蛋白Claudin-11表达的影响，为进一步研究量子点对雄性生殖的毒性作用机制提供理论基础。

参考文献：

[1]韩莹，谢广云，刘娜．碲化镉量子点对小鼠睾丸组织的氧化损伤[J]．生态毒理学报，2010．5（6）：894－898．

[2]HardmanR．Atoxicologicreviewofquantumdots：toxicitydependsonphysicochenemicalandenvironmentalfactors[J]．NatureBiotechnology，2006．22（8）；969－976

[3]余强，李坤刚，文兴，李君，王玉秋．纳米硫化镉量子点细胞毒性作用机制[J]．生态毒理学报，2009．4（4）：488－493

[4]杨林，许恒毅，魏华．量子点毒性机制及对生殖系统毒性的研究进展[J]．生殖与避孕，2012．32（12）：829836

[5]陈芝娟．非洲爪蟾睾丸紧密连接蛋白occludin和claudin-11的表达及功能分析[D]．浙江大学，2009．

[6]ChengCYandMrukDD.Theblood-testisbarrieranditsimplicationsformalecontraception[J].PharmacolRev．2012．6（4）：16－64．

[7]王萌萌，王吉龙，孙湖泊，孙志伟，黄沛力.碲化镉量子点Cd~(2 )释放对小鼠肝、肾组织毒作用的研究[J].生态毒理学报，2015．03：256－261．

2. 研究的基本内容和问题

1．研究目标

1.1研究碲化镉对雄性小鼠血睾屏障连接蛋白Claudin-11表达的影响

2．研究内容

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3. 研究的方法与方案

1研究方法

1.1免疫组化

免疫组化（IHC），是应用免疫学基本原理抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。

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4. 研究创新点

对血睾屏障链接蛋白Claudin-11进行定量和定性分析

5. 研究计划与进展

2015年6月-2015年9月

查阅文献资料了解国内外研究概况，了解实验意义

2015年10月-2015年12月

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