1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1研究意义及背景红罗非鱼在分类上隶属于丽鱼科,罗非鱼属,是莫桑比克罗非鱼和尼罗罗非鱼杂交后代的突变种。
红罗非鱼体呈红色,形似真鲷,体腔无覆膜,肉质鲜美,生长速度快,繁殖能力强,适应盐度较广,且具有较强的抗病力,经济价值和营养价值高,深受消费者喜爱[1]。
然而,因红罗非鱼为属间杂交选育所得,在种质方面存在遗传渐渗和混杂现象,选育养殖时易出现生长速度慢、体色分离等问题,大大影响了红罗非鱼的推广与销售[2]。
2. 研究的基本内容和问题
1研究目标探究tyr和dct基因在不同体色红罗非鱼以及红罗非鱼不同组织的表达特性。
2研究内容(1)从红罗非鱼皮肤转录组文库中获取tyr和dct基因的片段;(2)根据片段设计红罗非两个基因的实时荧光定量引物;(3)利用实时荧光定量技术研究dct基因在红罗非不同组织及不同体色红罗非鱼皮肤中的表达;(4)研究tyr基因在红罗非不同组织及不同体色红罗非鱼皮肤中的表达。
3拟解决的关键问题通过红罗非鱼黑色素合成途径中关键的调控基因tyr和dct的表达特性研究,为红罗非鱼体色分化变异的分子机制奠定基础。
3. 研究的方法与方案
1研究方法采集红罗非鱼的组织样本,提取其中的RNA,并将其反转录为cDNA,利用实时荧光定量PCR技术,测定不同组织中的基因量。
根据实验数据,分析基因的相对表达量,及其与鱼体体色的关系。
2技术路线详见附件3研究方案首先,从红罗非鱼皮肤转录组文库中获取tyr和dct基因的片段。
4. 研究创新点
本次实验从红罗非养殖中发现的体色分离现象出发,运用鱼类遗传学理论,结合实际,选取了创新性的研究角度。
从黑色素合成通路的分子角度出发,利用新型的科学技术,对红罗非鱼的体色分离进行深入研究。
5. 研究计划与进展
1研究计划2017年9月至10月,查找搜集相关文献资料,了解实验原理和仪器操作。
2017年11月至12月,采集样本,设计引物。
2018年1月至2月,进行荧光定量测定基因量。
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