1. 研究目的与意义
健康是促进人的全面发展的必然要求，是经济社会发展的基础条件，是民族昌盛和国家富强的重要标志，也是广大人民群众的共同追求。在党的十八届五中全会上，明确提出推进健康中国建设，对当前和今后一个时期更好保障人民健康作出了制度性的规划与安排。作为人民生活赖以生存条件之一的食品，其安全更是重中之重。引起食品安全问题的主要因素是食源性致病微生物，其中沙门氏菌(Saimonella)是重要的食源性致病微生物之一。食品在加工、运输、出售过程中往往被沙门氏菌污染，其在粪便、土壤、食品、水中可生存5个月至2年之久。 沙门氏菌感染常常会引发胃肠炎型、败血症型、类伤寒型、感冒型和霍乱型食物中毒，主要症状以急性肠胃炎为主，伴有发热、恶心、呕吐、腹泻及腹部绞痛等症状。在全球范围内，每年有超过一亿人感染沙门氏菌，而在中国,近八成的细菌性食物中毒事件是由沙门氏菌引起的，而其中肠炎沙门氏菌（Salmonella enterica serovar Enteritidis）是沙门氏菌属中流行性最强的血清型之一。
对肠炎沙门氏菌进行消毒处理是减少细菌污染的有力处理方式。次氯酸钠（Sodium Hypochlorite, NaClO）是一种高效的含氯消毒剂，能够有效杀灭细菌、真菌及病毒等微生物，但由于消毒剂自身不稳定及使用不合理等原因，常以亚致死浓度存在于食品加工环境中,从而诱导沙门氏菌产生抗性，包括对不同浓度下同一种消毒剂的直接抗性以及对其他化学因子的交叉抗性。这类抗性的存在导致消毒剂无法发挥其最大作用将食源性致病菌完全消灭，同时加大了食品的安全隐患。已有实验表明不同浓度的次氯酸钠溶液会诱导肠炎沙门氏菌产生直接抗性，但是是否会与酸、碱、盐产生交叉抗性这一问题亟待解决。因此，本研究以经三个不同浓度次氯酸钠胁迫培养至稳定期的肠炎沙门氏菌为试材，拟对酸、碱、盐溶液的交叉抗性进行研究，为次氯酸钠消毒杀菌技术在食品行业中的有效使用提供进一步的理论及实验基础，对保障食品生产加工、贮藏转运过程中的安全及建立食品质量安全控制体系具有重要意义。
2. 研究内容和预期目标
本文对经三个不同浓度次氯酸钠胁迫培养至稳定期的肠炎沙门氏菌对酸、碱、盐的交叉抗性进行研究，参考并改进美国CLSI推荐使用的微量稀释法来测定不同酸、碱、盐对次氯酸钠胁迫组菌体的MIC和MBC值，从而确定次氯酸钠胁迫组菌体是否对该酸、碱、盐产生交叉抗性。
关键问题：研究不同浓度次氯酸钠胁迫后肠炎沙门氏菌对酸、碱、盐的交叉抗性。
写作提纲：第一部分为背景分析和研究意义；第二部分为实验材料与实验方法；第三部分为结果与分析；第四部分为结论。
3. 国内外研究现状
消毒剂常用于杀灭致病性微生物，通过切断传染源的传播途径来控制传染病的传播，为人们的日常生活提供更多的健康保障。含氯消毒剂在溶于水后能产生具有杀微生物活性的次氯酸，可杀灭多种微生物，包括细菌繁殖体、病毒、真菌和芽胞。目前国内外关于次氯酸钠这类消毒剂的适用范围、功效分析和实际应用等方面研究成果较多，但次氯酸钠对致病微生物的胁迫作用及交叉抗性的相关研究较为冷门，还需要进一步的试验与研究。
国外相关研究有Anvita Kumar等发现通过高温胁迫的肠炎沙门氏菌森夫滕贝格血清型在更高的温度下，对加热的耐受性大大增加，其在酸胁迫环境下会合成特定的外膜蛋白，这类蛋白能够使致病菌更加适应酸性环境。
国内相关研究有何守魁等通过乙醇胁迫诱导肠炎沙门氏菌的实验研究发现，乙醇胁迫能够诱导肠炎沙门氏菌对乙醇形成直接抗性，但其稳定性会受到温度的影响，对-20℃、苹果酸和过氧化氢能够形成交叉抗性。乙酸胁迫会导致肠炎沙门氏菌的细胞表面疏水性降低，但菌体的自凝集能力会有提升，同时不会破坏细胞膜完整性和流动性。
4. 计划与进度安排
1、2021年11月1日-2021年11月30日：确定课题内容及研究计划，搜集、查阅相关文献资料，了解目前国内外研究动态。
2、2021年12月1日-2021年12月15日：进行实验的前期准备工作；完成课题的开题报告和文献收集工作。
3、2021年12月16日-2022年1月15日：初期阶段准备三种浓度次氯酸钠胁迫的肠炎沙门氏菌，并确定酸、碱、盐溶液的种类及浓度；中期阶段用选定的酸、碱、盐溶液不断胁迫经三种浓度不同的次氯酸钠胁迫培养至稳定期的肠炎沙门氏菌，观察其交叉抗性；后期整理数据，测定不同酸、碱、盐溶液胁迫组菌体的MIC值和MBC值，得到最终结果。
5. 参考文献
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刘素可,张彪,路娟娥,等. 沙门氏菌在食品中的生存策略及其防控的研究进展[J]. 食品科学, : 1-10.
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HALD T. Scientifific opinion on a quantitative microbiological risk assessment on Salmonella in slaughter and breeder pigs[J]. Molecular amp;biochemical parasitology,2010,20(30):225-231.
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何守魁. 肠炎沙门氏菌应对乙醇胁迫的抗性形成机制[D].上海交通大学,2019.
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