1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
猪德尔塔冠状病毒的N基因表达1.概述1.1课题背景研究及意义猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)属于德尔塔冠状病毒属,是一种新型猪肠致病性冠状病毒,可导致新生仔猪急性腹泻、呕吐和脱水[1-5]。
PDCoV最初于2012年在香港的一项分子监测研究中被发现,后来于2014年在俄亥俄州(美国)的腹泻猪群中出现[2,6]。
随后,疫情爆发在全球传播,并在韩国、中国大陆、泰国、越南和老挝的猪崽粪便样本中检测到该病毒[7-10]。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
一、本课题要解决的问题研究PDCoV的N蛋白的原核表达二、拟采用的研究途径1.根据已公开的PDCoV核苷酸序列,选取合适引物对N基因进行扩增。
2.在成像仪紫外照射下,切含阳性目的条带的凝胶块放入EP管中,提取重组质粒pMD19-T-N,并分析测序。
3.构建pCold 1-N/BL21重组质粒,IPTG诱导大肠杆菌表达蛋白,Western Blot鉴定目的蛋白成功表达。
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