1. 研究目的与意义
内容：1.提取分离黄连解毒汤的三个有效部位：总生物碱、总黄酮和总环烯醚萜，采用回流提取法和大孔树脂分离法，回流提取 2 次，第一次加 10 倍量水回流提取 1.5小时，第二次加 8 倍量水回流提取 1 小时，过滤，合并滤液，浓缩，过 HPD100 和 AB-8（比例 2:1）混合型大孔树脂柱，用不同比例乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，冻干，用紫外分光光度计分别测量每种有效部位的含量。
2.探究黄连解毒汤有效部位对 SD 大鼠脑组织神经递质的影响。
具体内容如下，将50 只 SD 大鼠随机分为 5 组：对照组、总生物碱组、总黄酮组、总环烯醚萜组和复方组。
2. 文献综述
焦虑症的治疗研究进展 钮 炜 （南京中医药大学,江苏 南京 210023）
摘 要：当前，随着社会不断进步，人们的生活压力日益加重，焦虑症的发 病率在逐渐上升。本文通过对焦虑症的临床症状、发病机理、治疗药物以及非药 物治疗等方面研究进展的综述，拓宽对焦虑症治疗方法的认识，为临床上治疗焦虑症而提供参考。 关键词：焦虑症；临床症状；发病机理；治疗药物；非药物治疗；研究进展 前言 焦虑症（AD）又称为焦虑性神经症，是神经症这一大类疾病中最常见的一 种，以焦虑情绪体验为主要特征。可分为慢性焦虑，即广泛性焦虑(GAD)和急性 焦虑，即惊恐障碍(PD)两种形式，其中以广泛性焦虑最为常见。为了给临床治疗 焦虑症提供依据，先就焦虑症的临床症状、发病机理、治疗药物以及非药物治疗 研究现状综述如下。 1．焦虑症的临床症状 1.1 慢性焦虑（广泛性焦虑）的临床症状 1.1.1 情绪症状 在没有明显诱因的情况下，患者经常出现与现实情境不符的过分担心、紧张 害怕，这种紧张害怕常常没有明确的对象和内容。患者感觉自己一直处于一种紧 张不安、提心吊胆，恐惧、害怕、忧虑的内心体验中，警觉性很高，容易发脾气， 而且会过度关注周围的环境和自身的健康，不放松，注意力难以集中，记忆力下 降。 1.1.2 植物神经症状 患者常常感到头晕、胸闷、心慌、心神不宁、呼吸急促、口干、尿频、尿急、 出汗、震颤、面部抽搐、耳鸣[1]等躯体方面的症状。1.1.3 运动性不安 患者坐立不安，坐卧不宁，来回踱步，四肢震颤，烦躁，很难静下心来。 1.1.4 呼吸道症状 广泛性焦虑症患者常常会有呼吸急促、呼吸困难的症状[2]。 1.1.5 心脏症状 有些患者会出现心悸、心律不齐的症状。 1.1.6 睡眠障碍 广泛性焦虑还体现在入睡困难，伴有睡眠浅、易醒、多梦[3]。 1.1.7 中医诊断症状表现 在中医学中，焦虑症为气郁化火型，患者急躁易怒，胸闷胁胀，口苦而干， 头痛目赤，嘈杂泛酸，心神不宁，口渴喜饮，小便黄赤，或头晕耳鸣，大便秘结； 舌象为舌红苔黄，脉象弦数[4]。 1.2 急性焦虑（惊恐障碍）的临床症状 1.2.1 濒死感或失控感 在正常的日常生活中，患者跟正常人几乎一样，没有区别。但是患者在某种 特定的触发情境时，比如封闭空间，就会突然发作，出现极度恐惧的心理，体验 到濒死感或失控感。 1.2.2 植物神经系统症状 植物神经系统症状会同时出现，比如胸闷、心慌、呼吸困难、出汗、全身发 抖、四肢震颤等。 1.2.3 发作持续时间 一般持续几分钟到数小时发作，发作时意识清楚。发作时患者往往会拨打 120急救电话，去看心内科的急诊。尽管患者看上去症状很重，但是相关检查 结果大多正常，因此往往诊断不明确。发作后患者仍极度恐惧，担心自身病情， 往往辗转于各大医院各个科室，做各种各样的检查，但不能确诊。既耽误了治疗 也造成了医疗资源的浪费。2.焦虑症的发病机理 2.1 从西医角度焦虑症的病因及发病机制 2.1.1 遗传因素 遗传因素影响焦虑症，马震祥[5]等对 80 例广泛性焦虑症患者采用家族史法 进行研究，证实广泛性焦虑症具有遗传效应, 其遗传方式符合常染色体隐性遗传 或多基因遗传。 2.1.2 神经递质因素 （1）γ-氨基丁酸（GABA）及其受体 γ-氨基丁酸（GABA）是抑制性神经递质，其与 GABAA受体结合，导致氯 离子通道开放频率增加，会促进大量氯离子的内流，引起细胞膜的超极化，神经 兴奋性降低，能有效地起到抗焦虑作用[6]。
（2）5-羟色胺（5-HT） 5-羟色胺会引起焦虑症的发生。小鼠动物实验结果表明把小鼠身上的 5-HT1A 受体和 5-HT1B 受体剔除后，会增加其焦虑不安的程度，表明 5-羟色胺 对焦虑症的发病起着重要的介导作用[7]。
3. 设计方案和技术路线
研究方案： 1.提取分离黄连解毒汤的三个有效部位：总生物碱、总黄酮和总环烯醚萜。采用较优工艺回流提取和大孔树脂分离有效部位，制成冻干粉，用紫外分光光度计分别测量每种有效部位的含量。 2.探究黄连解毒汤对 SD 大鼠脑组织中神经递质的影响。将 50 只 SD 大鼠随机分为5 组：对照组、总生物碱组、总黄酮组、总环烯醚萜组和复方组。将大鼠适应环境 6 天，按相对应的药物和剂量连续灌胃给药 7 天，第六天给药 1 小时后取粪便，进食 10 小时，第 7 天给药 1 小时后取大鼠血清、脑脊液、海马、纹状体、皮层。用 UPLC-MS/MS 测量海马、皮层、纹状体、脑脊液、血清、粪便中的 4-氨基丁酸、组胺、去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺、L-谷氨酸、乙酰胆碱的含量，探究黄连解毒汤的不同有效部位对大鼠脑组织中神经递质含量变化的影响。
技术路线：见附件
4. 工作计划
2022.12.29 联系指导教师，面谈，参观实验室。
2022.12.30-2022.1.5 熟悉实验室，开会商讨，确定实验课题。
2022.1.5-2022.1.10 查阅文献，整理资料，撰写实验设计流程。
5. 难点与创新点
1. 研究正常 SD 大鼠的神经递质的含量和分布情况。
不同的神经递质在大脑结构中及血清中的含量分布不同，反映靶器官的功能不同，有的神经递质起到兴奋作用，有的起到抑制作用。
正常情况下抑制与兴奋处于平衡状态，一旦破坏这种平衡，就会造成各种神经行为学异常，在临床上表现为神经行为疾病，而研究大鼠的神经递质的含量和分布情况，对阐明黄连解毒汤对神经递质的影响有重要的指导意义。
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