1. 研究目的与意义
毕业设计内容
越来越多的研究表明，CD4 T细胞与多种免疫病的发生发展过程密切相关，如类风湿关节炎、银屑病、肿瘤等。CD4 T细胞可分化为Th1、Th2、Treg和Th17细胞等亚型。其中Th17细胞是一种不同于Th1和Th2细胞的Th细胞亚群，它能够分泌IL-17（IL-17A）、IL-17F，以及IL-21、IL-22、IL-6、TNF-α等细胞因子，因此Th17细胞被认为是重要的介导炎症反应的细胞。在机体健康状态下Th17细胞也能加强防御功能。Th17细胞亚群的发现，弥补了Th1/Th2介导效应机制的不足。
滋肾通络方（ZTF）是国医大师周仲瑛教授临床治疗类风湿关节炎（RA）的验方清络通痹方的简方，该方由雷公藤、青风藤、三七、生地、僵蚕五味中药配伍而成，具有养阴清热、祛风除湿、活血祛瘀、化痰散结的功效。项目组的前期研究表明，ZTF对RA的免疫紊乱具有良好的调节作用，可以调节CD4 T细胞的活性，但对其各亚型的作用尚不明确。鉴于Th17细胞在RA发生与发展中的重要作用，同时根据文献对方中三七、雷公藤调控Th17细胞的作用的证实，本研究拟从Th17细胞的角度，分别采用冻干粉制剂和含药血清，研究ZTF对Th17细胞分化和活性的影响，为阐明该方的分子机制提供依据。
2. 文献综述
干预Th17细胞分化和活性的药物研究进展
（范瑶婕，南京中医药大学，041215218）
摘 要：Th17细胞是一种新型的CD4 效应T细胞，在自身免疫性疾病、移植、感染性疾病、肿瘤等方面具有重要的调控作用。西药和中药都能影响Th17细胞的分化和活性，这可能是其防治疾病的机制之一。本文总结了临床常用的药物对Th17细胞分化的干预和影响，为以后的研究和临床治疗提供支持。
3. 设计方案和技术路线
一、研究方案
1、实验药物及含药血清制备：
（1）ZTF冻干粉制备：按比例取ZTF生药共1000g，加入10L水浸泡4h，将药物及浸泡液加入提取机组（80℃，负压）提取，计量冷凝水体积，直至存罐中只剩1L水液，取出。将水提液倒入冷冻盘，放入-80℃冰箱冷冻过夜，将冷凝盘放入真空冷冻干燥机，干燥48h，直至呈粉末状。收集冷冻粉，密封保存，放入干燥剂置于干燥处。
4. 工作计划
第一阶段：2022.01文献综述，形成思路，实验方案制定；
第二阶段：2022.02初步试验、实验条件选择；
第三阶段：2022.03-04进行实验研究；
5. 难点与创新点
1、Th17细胞是免疫疾病发生与发展的重要参与者。它在机体健康状态下能加强防御功能，在炎症中能促进炎性反应。从Th17细胞的角度，研究滋肾通络方免疫调节作用的机制，对于阐明其分子生物学机制，指导临床科学用药有重要指导作用。
2、本研究结合体外血清药理学方法，同时观察中药提取物和含药血清对Th17细胞分化和活性的影响，有利于兼顾药物在体内入血后的成分变化和排除中药制剂的各种干扰因素(如pH,渗透压等)，有利于更加客观全面地考察中药复方制剂的分子机制。
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