1. 研究目的与意义
茜草Rubiae Radix et Rhizoma为茜草科植物茜草Rubiacordifolia L.的干燥根和根茎。春、秋二季采挖，除去泥沙，干燥。产于东北、华北、西北和四川（北部）及西藏（昌都地区）等地。常生于疏林、林缘、灌丛或草地上。分布于朝鲜、日本和俄罗斯远东地区。茜草苦、寒。归肝经，主要功能为凉血，祛瘀，止血，通经。用于吐血，衄血，崩漏，外伤出血，瘀阻经闭，关节痹痛，跌扑肿痛。最早入药记录在《黄帝内经》中：四鸟贼骨-藘茹丸，茜草具有凉血止血、祛瘀通经的功效，是临床上常用的中药之一，传统经验一般认为茜草生用具有活血通经功效，炒炭具有止血功效。
茜草在炒炭炮制前后其化学成分发生了变化，较生品而言，茜草炭中总蒽醌、羟基茜草素、大叶茜草素含有量降低，而异茜草素、1，3，6-三羟基-2-甲基蒽醌、鞣质以及微量元素升高。研究表明，茜草在炮制后，其止血作用增强，抗炎、镇痛、活血化瘀等药理作用减弱。而茜草和茜草炭两者的止血作用机制不同，茜草主要通过提高血小板计数，对抗肝素及双香豆素的凝血作用来发挥止血作用；茜草炭主要通过抑制毛细血管通透性，缩短凝血酶时间、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间来发挥止血作用。茜草炭止血作用增强，可能是由于茜草炒炭过程中部分药物炭化，碳素物理吸附作用与收敛作用降低了毛细血管通透性，从而抑制血液渗出，增强了止血作用, 同时茜草炒炭后钙离子含量增加，激活凝血酶原作用增强，缩短了凝血酶时间、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间。另外还可能与炒炭后化学成分发生改变，止血成分生成或增加有关。
本课题以茜草、茜草炭为研究对象，运用色谱分离技术对茜草化学成分进行分离、纯化、鉴定，应用主成分分析推测茜草及茜草炭差异性成分，并通过MRM对差异性成分进行定量研究。建立斑马鱼出血模型，将单体应用于此模型进行实验，确定茜草、茜草炭止血活性的有效成分，为进一步研究茜草止血的有效成分提供科学依据。
2. 文献综述
见附件。
3. 设计方案和技术路线
见附件。
4. 工作计划
2022年2至3月，完成文献查阅，撰写综述。
2022年4至5月，完成实验，处理数据。
2022年6月，完成论文撰写。
5. 难点与创新点
利用多柱色谱联用技术，采用极性分离方法，从茜草根中分离、富集、纯化茜草各有效成分，并采用NMR等方法进行结构确定，将化学成分作用于斑马鱼胚胎，观察其止血作用，为茜草进一步研究提供科学依据。
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