1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
活血丹G1echoma longituba (Nakai) Kupr.为唇形科活血丹属多年草本植物,又名遍地香、地钱儿、透骨消、透骨风、团经药、金钱薄荷等。
其干燥地上部分入药,药材名连钱草(《中华人民共和国药典》(2015年版)收录)。
春至秋季采收,除去杂质,晒干入药。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标: 在前期预实验的基础上,利用响应面Box-Behnken设计法优化活血丹中黄酮的提取方法。
研究内容:1、活血丹的采集、洗涤、干燥和打粉2、活血丹黄酮化合物-超声辅助法醇提3、以乙腈(A)-0.5%冰醋酸(B)为流动相进行梯度洗脱采进行液相检测4、活血丹中黄酮类化合物提取工艺的响应面优化拟解决问题:通过响应面法优化超声辅助法醇提黄酮的实验,以总黄酮、木犀草苷、木犀草素、芹菜素分别作为响应值,通过数据分析,从而得到优化连钱草总黄酮提取工艺。
3. 研究的方法与方案
研究方法:响应面法优化超声辅助法醇提法技术路线:采集洗涤干燥打粉提取液相检测响应面实验实验方案:1.活血丹中黄酮类化合物的提取工艺称取少量活血丹干燥粉末于锥形瓶中,加入一定体积的适宜浓度的乙醇溶液,称定重量后超声使充分提取,取出静置使冷却至室温,称定补足重量,抽滤,取续滤液,即得活血丹提取液,备用。
2.活血丹中黄酮类化合物的液相检测方法以乙腈(A)-0.5%冰醋酸(B)为流动相进行梯度洗脱,洗脱程序见表1,色谱柱:迪马钻石plus C18,4.6250mm,5μm;检测波长为350nm;流速为0.8mL/min;进样量为20μL。
3.活血丹中黄酮类化合物提取工艺的响应面优化 运用Design-Expert 8.0.6软件进行Box-Behnken响应面设计和数据分析。
4. 研究创新点
本实验采用响应面法优化超声辅助提取来提取黄酮,利用响应面法可以分析单个变量的影响, 根据少量试验便能够提供大量的信息;其次能够研究变量之能够研究变量之间的关系,例如交互作用,另外还可以建立用于预测的模型。
总之,其以最经济的方式,较少的实验次数和较短的时间对所选的实验参数进行全面研究。
5. 研究计划与进展
2015.04-2015.05查阅相关文献,了解最新动态,细化研究内容,确定研究方法,并制定实施方案。
2015.09-2015.11 采集活血丹样本 2015.11-2015.12 活血丹样本干燥及打粉2015.12-2015.01 提取活血丹粉末中的黄酮类成分2015.01-2015.03 运用响应面法实验2015.03-2015.04 实验数据分析及其总结
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