柴胡浸膏制备四逆散可行性研究开题报告

课题的意义、国内外研究进展、应用前景等（列出主要参考文献）

国内外研究进展

四逆散出自《伤寒论·辨少阳病脉证病治》，由柴胡、枳实、芍药、炙甘草组成，具有透邪解郁、疏肝理脾的功效。本方仅四味药，但选药精炼，配伍严谨，被后世赞誉为疏肝之祖方，多年来备受医家青睐；近现代以来，随着对四逆散研究的深入，四逆散已广泛运用于内、外、妇、儿等各科领域

1药理作用与临床应用

对于四逆散的研究，国内外一直将关注重点放在药理作用与临床应用方面，其中四逆散的药理作用主要包括抗肝损伤、降血脂、增强免疫力、催眠作用、解痉作用和改善微循环等，临床应用多为慢性胃炎、肝胃不合、肠易激综合征、肝脏疾病、抑郁症等^[1-3]。

1.1消化系统

曹祖清等^[4]将100例胃食管反流性咳嗽患者随机分组，对照组采用常规西药治疗,实验组则使用中药四逆散加味治疗,分析两组治疗效果。结果显示试验组总有效率（96.00%）高于对照组（76.00%），其中实验组治疗后的IL-8、SP水平生活质量评分优于对照组（P＜0.05）；结论得出接受中药四逆散加味治疗，胃食管反流性咳嗽患者取得较好效果。方国兴等^[5]将156例小儿功能性消化不良患者随机分为对照组和观察组,对照组78例采用布拉氏酵母菌0.25 g/次,2次/d；观察组78例采用布拉氏酵母菌联合四逆散加味 2.5 g/次,3次/d；两组患者治疗前后分别观察临床疗效、症状改善时间、血清细胞因子及胃肠激素水平的变化；结果观察组总有效率为96. 15%，对照组总有效率为82. 05%，观察组较对照组治疗效果显著升高（P0.01）。治疗后,两组血清IL-10,MTL水平均较本组治疗前上升,IFN-γ,TNF-α,Leptin水平较本组治疗前下降,但治疗组下降或上升幅度显著大于对照组（P 0.01）。观察组症状消失时间显著短于对照组（P0.01）。提示加味四逆散可能与有效调节血清细胞因子及胃肠激素水平有关。龚时贤^［6］采用四逆散合用茵陈和薏苡仁治疗乙型肝炎42例，结果总有效率为90.5% ，提示本方有化湿解毒、疏肝理气的功效，对治疗乙型肝炎有较好疗效.冯健茹^[7]结合126例HHcy患者，随机数字法分为对照组（安慰剂）、西药组（多烯磷脂酰胆碱胶囊和叶酸片）、中药组（茵陈蒿汤合四逆散方），42例/组，观察治疗前后临床有效率，结果表示治疗后中药组、西药组ALT、AST、Hcy、TC、TG、MDA、hs-CRP，症状积分较治疗前明显降低（P0.05）,提示茵陈蒿汤合四逆散改善NAFLD伴Hcy患者的高同型半胱氨酸血症、肝功能、血脂以及氧化、炎症状态。

1.2中枢神经系统

史亚飞等^[8]等将132只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、加味四逆散组、氟西汀组，并在不同取材节点设置青少期、成年期、成年后；复制慢性不可预知应激

（CUMS）大鼠模型，分别处理后观察观察海马CA1区5-HTT阳性细胞的分布变化。

结果提示在青少期受到CUMS的大鼠可产生抑郁样行为，抑郁大鼠海马内5-HTT改变可能是加味四逆散干预作用的重要通路。李越峰等^[9]将SD雄性大鼠随机分为空白组、阳性组（盐酸帕罗西汀溶液）、阴性组（0. 9%Na Cl）、四逆散冻干粉组（四逆散冻干粉水煎液）、混合物组（辛弗林-芍药苷-柴胡皂苷C-甘草次酸=8.5:1.0：1.5:6.5）；随后用HPLC法观察脑脊液移行成分，结果显示给予是四逆散冻干粉后脑脊液中成分峰面积是空白组的12.5倍，血清中四逆散四种有效成分均可使脑脊液内源性物质峰面积高于空白对照组，但低于四逆散全方作用，结论提示四逆散冻干粉是通过促进脑脊液中内源性物质5-羟色胺的分泌达到改善睡眠作用的，同时表明四逆散不同配伍对改善大鼠睡眠起到不同程度作用。

1.3妇科疾病

四逆散本是治疗少阴病，后世医家将其作用发挥以疏肝理气，广泛应用于治疗肝气郁结，气血不和，冲任带脉功能异常而引起的经、带、胎、产、杂等疾病。近现代很多妇科名家在医疗实践中，都非常重视治疗女子疾患时疏肝理气法的应用。林振文等^［10］用四逆散加减治疗乳癖（即乳腺小叶增生症） 1-3个疗程，结果显效（症状及肿块消失）268例，有效49例，无效33例。段爱英等^［11］采用四逆散加味治疗76例不孕症患者，总有效率84% ，提示四逆散具有促进排卵、促使受孕的作用。

课题意义

四逆散有效成分主要集中在柴胡皂苷a、芍药苷、以及枳实甘草中的黄酮类成分，。四逆散化学成分的研究主要集中在单味药有效成分的分离与鉴别，有关复方的研究未见报道。其中，单味药成分对其他三味药有效成分含量变化影响报道尚不多见。钱兆丰^[12]通过构建肝纤维化大鼠模型，设置四逆散不同剂量、柴胡芍药不同剂量、对照组、病理组等探究不同配伍对肝纤维化治疗效果，结果表示四逆散高、中剂量对抗肝纤维化作用明显，四逆散低剂量组、柴胡芍药配伍高剂量组、预防组对抗肝纤维化有一定效果。李惠杨^[13]将雄性SD大鼠分组，分别灌胃给予大鼠四逆散全方煎剂及7个不同配伍组煎剂,并检测芍药苷的血药浓度,计算并分析各组的主要药代动力学参数。结果显示柴胡、枳实、甘草均对芍药苷药效的发挥起到了积极促进作用,经全方配伍后,四味药物间产生了有别于各拆方配伍组的协同作用。四味药物相辅相成,能够更加长久地维持方中主要有效成分芍药苷在生物体内相对稳定的血药浓度,有利于其持续发挥药效,与其他配伍组相比具有极为明显的优势。温静^[14]对比各单味药材、药对与四逆散全方的化学成分谱发现,四逆散在配伍过程中没有产生新成分。但芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、甘草酸、柚皮素、柴胡皂苷a在四逆散中的含量均高于其在各单味药材中,且具有显著差异,7种化合物在其药对中的含量,与其在各单味药材中相比,也有不同程度地增加。

本实验通过单独提取柴胡浸膏，依照提取时间不同，设置不同提取浓度，分别制备与不同配伍组煎剂，并检测芍药苷的含量，探究柴胡浸膏制备四逆散的可行性。

另外，前人的研究表明，四逆散中的四味药相辅相成，全方配伍后,四味药物间可以产生有别于各拆方配伍组的协同作用，本实验通过设置柴胡完全提取后，柴胡纤维素

搭配不同比例白芍、枳实、甘草，探究柴胡纤维素对芍药苷含量变化影响。以复方四逆散为研究对象,以传统中医药理论为指导,选择方中最小配伍单位-“药对”为关联点,从全方-药对-单味药材-化学成分单体水平进行多层次地深入研究工作,探究四逆散的配伍机理。

参考文献：

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[7]冯健茹,许光远.茵陈蒿汤合四逆散治疗非酒精性脂肪肝伴高同型半胱氨酸血症的临床观察[J/OL].中国实验方剂学杂志:1-6[2019-03-10].

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