1. 研究目的与意义
1.研究现状及发展趋势
1.1 背景:
Ⅱ型胶原蛋白有着典型的长且坚韧的三螺旋结构由2条α1肽链和 l条 α2肽链组成。3条α肽链交互缠绕形成绳索状的超螺旋结构,每条肽链的序列为连续重复的Gly-X-Y(X为脯氨酸,Y为羟脯氨酸或羟赖氨酸)[1-3]。Ⅱ型胶原蛋白具有吸水性、吸油性、保水性、起泡性和乳化性。Ⅱ型胶原蛋白及其衍生产品因其优异的生物相容性、易生物降解性和弱抗原性而在食品、医药和化妆品有着广泛应用[2-7]。
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2. 研究内容和问题
研究内容:
(1)提取方法的确定;
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3. 设计方案和技术路线
研究方法:本课题拟采用酶解法从鸡胸软骨中提取UC-II,鸡胸软骨经粉碎-脱脂-酶解-盐析-透析-冻干后得到UC-II粗品,考察酶解温度、时间、提取次数、超声等工艺因素对UC-II产率和纯度的影响,并优化提取工艺。采用DEAE琼脂糖凝胶柱纯化UC-II粗品,采用SDS-PAGE考察UC-II粗品的纯化效果,并优化洗脱条件。最后将提取纯化得到的UC-II进行鉴定和初步的质量评价。
技术路线:鸡胸软骨酶解法提取UC-II粗品---提取工艺的摸索和优化---UC-II粗品的纯化---洗脱条件的摸索和优化---UC-II纯品的鉴定和质量评价。
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4. 研究的条件和基础
实验室仪器设备符合该研究的要求,课题组在该领域有相应的经验。
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