1. 研究目的与意义
内容：
1、氢化可的松乳膏药物成分的鉴别
2、建立紫外测定氢化可的松乳膏含量的方法学
2. 文献综述
紫外法测定氢化可的松乳膏含量文献综述
陈晓霖 12制药工程 049012111
摘要 氢化可的松为氢化可的松乳膏的主要药物成分，采用紫外分光光度法测定其药物含量，有利于保障制剂质量安全，提供临床安全有效的用药。
关键词：氢化可的松；含量测定；研究进展
氢化可的松乳膏为本市某皮肤病性病防治所生产的非标准制剂。氢化可的松为氢化可的松乳膏的主要药物成分，是一种糖皮质激素类药物，具有抗炎、抗毒、抗休克和免疫抑制等多种药理作用。①抗炎作用：对除病毒外的各种病因引起的炎症均有作用，糖皮质激素类药物能够减轻和防止组织对炎症的反应，从而减轻炎症的症状，亦可抑制炎症后期修复组织，减少后遗症。②抗毒、抗休克作用：糖皮质激素类要我能提高机体的耐受能力，减轻细胞损伤，发挥保护机体的作用。还有扩张血管，增强心肌收缩力，改善微循环等作用。③免疫抑制作用：防止或抑制细胞中介的免疫反应，延迟性的过敏反应，并减轻原发免疫反应的扩展[1]。
氢化可的松为激素类成分，不良反应多且严重，可引起局部皮肤萎缩，毛细血管扩张、色素沉着、毛囊炎、口周皮炎以及继发感染[2]。
为了保障制剂质量安全，提供临床安全有效的用药，有必要建立氢化可的松的含量测定方法，并对其进行验证。
制法为：取油相白凡士林、液状石蜡、单硬脂酸甘油酯、十六醇，置水浴上加热熔化至70~80℃；另取十二烷基硫酸钠（水包油乳化剂），尼泊金乙酯，甘油等水相成分一起加热熔化70~80℃；将油相缓缓加入水相中搅拌，待温度降至70℃时，缓缓加入预先用二甲基亚砜溶解的氢化可的松粉备用液，搅拌至冷凝即可[3]。
氢化可的松为白色或几乎白色结晶性粉末；无臭。初无味，随后又持续的苦味；遇光易变质；具有旋光性。不溶于水。其醋酸酯为白色或几乎白色结晶性粉末；无臭。
氢化可的松乳膏含量测定研究
1旋光法[4]
根据氢化可的松具有旋光性的特点，我们可以采用旋光法测定其乳剂中氢化可的松的含量。
取样品适量（约相当于氢化可的松20mg），用无水乙醇洗涤三次，每次洗涤10mL，并入至100mL容量瓶中，加无水乙醇至刻度线，作为供试品，测其旋光度。结果表明，旋光法操作简便，结果准确可靠。测量结果与其他方法比较，没有显著差异。
2荧光光度法[5]
将氢化可的松标准溶液适量(C≤3. 86210-6mol/L) 放入到25mL容量瓶中,再加入pH =10. 38的BR缓冲溶液（BR缓冲溶液是由磷酸、硼酸和醋酸混合而成，向其中加入不同量的氢氧化钠可以组成pH范围很宽的缓冲溶液，pH=1.8~11.9 。属于广域缓冲溶液）5.0mL,用水稀释至刻度,摇匀。室温放置10min后,设置荧光光度计最大激发波长(λex ) =360nm,最大发射波长(λem) =488nm，将溶液放于荧光光度计上处测定溶液的相对荧光强度。
荧光光度计的仪器参数: 激发波长,发射波长的狭缝宽度均为5nm,响应时间为2s。
a:激发光谱 b:发射光谱 1， 氢化可的松乙醇溶液 2， 氢化可的松 硫酸 BR缓冲液 C=1.37910^-6mol/L |
3紫外分光光度法测定含量研究
《药典》上使用的测定氢化可的松乳膏含量的方法为紫外分光光度仪法。取适量本品，溶解于无水乙醇，抽滤得到供试品溶液。取适量已知浓度溶液，加无水乙醇9mL，与氯化三苯四氮唑溶液1mL，摇匀，各再精密加氢氧化四甲基铵试液1mL，摇匀，在25℃的暗处放置40~45分钟，照紫外分光光度法，在485nm的波长处分别测定吸光度，计算，即得[6]。
3.1氢化可的松的提取处理工艺改进[7]
方法：取100mL容量瓶，将样品适量（约相当于氢化可的松20mg）放于容量瓶中，加无水乙醇30mL，置水浴上加热溶解后，置冰浴中降到室温时，放置室温加无水乙醇至刻度线，摇匀，抽滤得到滤液为供试品。
讨论：《药典》中的方法，用冰浴冷却的方法，没有规定冷却的时间，过滤后不能使基质完全凝固，总有少量絮状基质滤到滤纸上，使得三次提取不完全，测量结果偏低，而且操作繁琐耗时。改进后的新方法，有效解决了提取不完全的问题，测量结果没有明显差别，操作简便，节约时间，效率高。
3.2氢化可的松紫外测定含量溶剂的改进研究
氢化可的松片含量测定，中国药典记录方法均采用以无水乙醇为溶剂，在波长242nm处测定吸收度，计算含量。当采用水为溶剂时，氢化可的松的浓度在5~20 μg/mL范围内与吸收度有良好的线性关系，而且此方法操作简便，结果准确[8]。
方法：取100 mL容量瓶，精密称取适量(约相当于氢化可的松20 mg)样品置于容量瓶中，加水振摇使之溶解，加水稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取滤液5 mL，置于另一100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，以蒸馏水为空白，照分光光度法在248 nm波长出测定吸收度，按吸收系数E1%1cm为449.3计算得氢化可的松片药物含量[1]。
讨论：氢化可的松在水溶液中稳定，不受温度、时间等外界因素的影响，因此可用水为溶剂。以水为溶剂测定氢化可的松片药物含量，可节约无水乙醇，方便实用，本法与药典方法比较，结果基本一致。
4高效液相色谱法[9]
色谱柱为Hypersil ODS2 柱，规格是250 mm 4.6 mm，5μm;流动相为甲醇－水，比例是50: 50;检测波长为245 nm；流速为1.0mL/min；柱温为30℃；进样量为20μl。
对照品溶液的制备：精密称取氢化可的松对照品3.5 mg，置于50 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成氢化可的松对照品溶液，氢化可的松的含量为0.070 mg /mL。
供试品溶液的制备：精密称取氢化可的松乳膏0.20 g，置于50 mL 容量瓶中，加甲醇适量，超声处理10 min，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得氢化可的松供试品溶液。
Ax Ar |
式中，Ax为供试品峰面积；cX为供试品的浓度；Ar为对照品峰面积；cR 为对照品浓度。
5其他方法
当乳膏中含有除氢化可的松以外的抗生素时，可采用HPLC-ELSD(蒸发光散射检测器)法[10]，或者双波长分光光度法[11]。
利用顺序注射- 化学发光联用技术[12]，基于酸性条件下，氢化可的松对高锰酸钾- 亚硫酸钠体系发光反应具有明显的增敏作用，建立顺序注射化学发光测定氢化可的松含量的分析新方法，快速、准确、简便、试剂消耗少、灵敏度高、线性范围宽。
如果样品存在于中药提取液中，因为含量成分复杂，一般分光光度法测定其含量专属性差,结果不理想。采用导数分光光度法测定氢化可的松的含量,排除了处方中其它成分的干扰,不需对样品进行特殊处理,能较好地反映本品的质量,且方法简便易行,重现性好,结果满意[13]。
结语
测定氢化可的松含量的方法有多种进展，包括旋光法，荧光光度法和高效液相色谱法，药典上记录的传统的紫外分光光度法也有多种改进，各种各样的进步与创新，对于氢化可的松的含量的测定将会越来越准确，越来越简便。
参考文献
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[13] 曹卫菊，盛国荣.导数分光光度法测定祛白酊中醋酸氢化可的松的含量[J].海峡药学.2002,14(2):24-26
3. 设计方案和技术路线
4. 工作计划
2022年1月：熟悉了解泰州食品药品检验所实验环境，协助并熟练实验操作。
2022年2月：查阅文献，搜集论文，收集相关科研学术材料。
2022年3月：氢化可的松乳膏药物成分的鉴别
5. 难点与创新点
1、 国内文献报道的对氢化可的松含量的测定中，包括高效液相色谱法测定乳膏中氢化可的松的含量，紫外分光光度法测定片剂中氢化可的松的含量，以及荧光光度法测定注射剂中氢化可的松的含量，对于用紫外分光光度法测定乳膏的氢化可的松的含量，目前尚无最新报道。
2、通过对紫外分光光度仪法的验证，可以筛选出实验中错误的测量结果，使得测量数据更加准确真实。需要进行验证的项目有标准曲线、稳定性试验、E1%1cm、回收率、样品测定。以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
