1. 研究目的与意义
钙离子通道是一种跨越细胞膜的结构，它严格控制着钙离子进入细胞的过程。由于钙离子信号与很多重要生理功能相关，例如心脏收缩、基因转录等，因此调节钙离子进入细胞的精确反馈机制就至关重要。为了实现这一功能，每个钙离子通道都与一个钙调蛋白分子（calmodulinCaM）结合，从而通过钙离子与其羧基端小叶（C-lobe）和氨基端小叶（N-lobe）的结合实现对通道活性的调节。钙调蛋白与钙离子形成的复合物是构成钙离子感受器的重要原型，钙离子感受器与钙离子源密切相关。CaM的羧基端小叶能感应局域的钙离子大幅振荡，这是由于主通道的钙离子流引起的。而氨基端小叶则感应全局的较远距离源引起的钙离子小型改变。
Hodgkin-Huxley模型准确描述了神经元细胞膜上电压与电流的变化过程,HH模型发生动态Hopf分岔的仿真结果表明细胞膜受刺激后产生连续动作电位的异变波形同医学实验中观察到的病变现象十分相似,说明生理参数变化引发生物系统分岔可能是肌肉疾病的诱因。
2. 课题关键问题和重难点
1、复苏细胞时应在37℃水浴锅中，事先取好培养基再复苏，无菌操作。如果细胞状态不好，可以加抗生素。
2、细胞培养时，要选取合适的培养基，而且培养基要适量。
3、转染时最好用新鲜培养的细胞，贴壁细胞密度在70％-80％最好。转染后4小时，一定要换液。
3. 国内外研究现状（文献综述）
1、CalciumChannel钙离子通道
Ca2 主要通过嵌在膜上的特种蛋白质形成的孔道进入胞內，称之为C2 通道。钙通道是由5种亚基肽链合成，其中α1最重要，由它组成通水和离子的孔道。其它只起辅助和调节α1亚基的功能。钙通道的开关受膜电压、受体和胞内钙量调控。进入胞内的Ca2 ，由Ca2 ATP酶将Ca2 泵入內质网和肌浆网中贮存，需要时两网上的肌醇三磷酸和雷诺丁两种受体进行调控，使贮存的Ca2 又释放至胞质内，发挥生理功能，诸如细胞的收缩、增殖、分泌(包括神经递质的分泌)、代谢、凋亡、神经元兴奋、酶活性等的调节等，还起第二信使作用。当胞內Ca2 过多时，细胞膜上Ca2 ATP酶能将其泵出胞外，或经Na -Ca2 交换出胞外，通过以上机制维持胞内Ca2 在低浓度下的动态平衡。细胞启动生理活动时的Ca2 为10－6molL－1，持续超过此浓度即形成钙超载，会损伤细胞，甚至引起疾病，如高血压、胰腺炎、偏头痛、癫痫、慢性神经性疼痛、阿尔采末病等。有些药物作用于钙通道的出入口的结合，可阻断Ca2 进入细胞，即Ca2 通道阻断剂，能防止钙超载起治疗作用。
2、hCav1.2
4. 研究方案
1、向CHO-K1细胞中转入hCav1.21/β2/α2δ质粒
2、将转入质粒的细胞转移至10cmdish并加入G418抗体，进行培养。
3、培养出有G418抗性的细胞，形成混合克隆。
5. 工作计划
第二学期
第16-18周确定毕业论文题目，查阅相关文献资料，熟悉公司环境，并进行理论和技能培训。
第19-20周初步确定研究方案，实验准备，撰写开题报告。
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
