1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
课题意义：前存在多种种子纯度鉴定法，但一些传统鉴定方法如籽粒形态学鉴定、组织化学鉴定，幼苗形态学鉴定、田间小区种植鉴定等都存在一定的局限性.DNA分子标记检验虽分辨率高但存在费用高，操作繁琐等缺点。
因此本次实验利SDS-PAGE凝胶电泳的方法进行4个小麦品种种子的纯度鉴定，以期较为便捷准确的测定小麦种子纯度。
概况：国内外很早就有利用聚丙烯酰胺凝胶电泳测种子纯度的方法，如利用醇溶蛋白聚丙烯酰胺电泳法测定小麦种子纯度等等，而通过这几十年的发展，聚丙稀酰胺测定种子纯度的方法有了很大的改进发展。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：测定4个小麦品种的纯度研究内容：利用SDS-PAGE凝胶电泳技术，通过对前期获得的小麦单粒种子的提取液进行处理，点样，获得小麦蛋白图谱并通过谱带分析差异性，从而测定小麦种子的纯度。
拟解决的关键问题：在进行SDS-PAGE凝胶电泳的过程中，由于小麦所含蛋白较多，因此谱带较杂，进行差异性分析时有一定的困难。
3. 研究的方法与方案
研究方法：利用小麦蛋白多样性，将获得的4个品种小麦各取100个单粒进行研磨，并加提取液等，利用SDS-PAGE凝胶电泳的方法，将所获样品经离心、提取上清液等处理后进行点样，最后经固定、染色、脱色，获得最后的蛋白电泳谱带，进行差异性分析，从而确定种子纯度。
技术路线：实验材料：小麦仪器：离心机，垂直电泳槽，电泳仪，水平摇床试剂：蛋白提取液、样品缓冲液、1.5 %琼脂粉封胶液、1电极缓冲液、4分离胶缓冲液、4浓缩胶缓冲液、30 %丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺溶液、分离胶(两块胶60 mL) 、浓缩胶(两块胶40 mL)、固定液、染色液脱色液SDS-PAGE过程(1)取江麦、宁麦，烟农，济麦4个品种的小麦种子各100粒，单粒研磨至粉末，加入600ml的蛋白提取液，室温静置1 h左右，离心；(2)准备电泳装置，用1.5 %的琼脂胶进行封胶，检测电泳装置，注意不要漏胶；(3)配制分离胶，灌胶至适当高度，一般认为当灌入浓缩胶插入梳子后，梳子的下端距离分离胶的距离约为1 cm。
用水饱和异戊醇覆盖，静置30 min；(4)配制浓缩胶，用蒸馏水缓慢冲洗两遍，用滤纸吸干胶面上的残留水分，灌入浓缩胶，灌满为止。
4. 研究创新点
SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统，与连续缓冲系统相比，能够有较高的分辨率。
此鉴定方法中，蛋白质的迁移率主要取决于它的相对分子质量，而与所带电荷和分子形状无关。
5. 研究计划与进展
计划在一个月内进行样品的准备工作，包括磨样，配置提取液，各类缓冲液等。
此后，进行点样，跑胶，最后经过固定、染色，脱色后，进行拍照，并调至考马斯亮蓝，进行谱带的读取分析。
目前还有条带读取分析工作未完成。
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
