1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.课题研究意义
根结线虫（Meloidogynespp.，root-knot nematodes，RKN）是一类重要的植物固定内寄生线虫，分布广泛，寄主种类庞大，环境适应性强，被认为是最具破坏的病原线虫种类之一[1]。迄今已报道的根结线虫种类有 90多个种[1]。在我国有记录的种类达 40 个种[2]，其中有 16 个种是由我国首次报道的。根结线虫的寄主种类广泛，包括蔬菜、果树和观赏植物等[3]，其中以茄科、葫芦科、十字花科的蔬菜作物受害最为严重[4]，每年由于根结线虫的危害造成的损失高达1370 亿美元[5]。对农业有经济重要性的根结线虫种类主要包括南方根结线虫（M.incognita）、爪哇根结线虫（M.javanica）、花生根结线虫（M.arenaria）和北方根结线虫（M.hapla）等四种常见种类。根结线虫经历卵-幼虫-成虫三个阶段，根结线虫2龄幼虫侵入植物根系。通过口针穿刺寄主细胞来汲取细胞质的营养物质，完成自身的生长发育，同时诱导植物根系形成大小不一的根瘿或根结，造成根系发育受阻，影响根系对水分和营养物质的摄取，从而影响作物的产量和品质，严重时造成减产甚至绝产[6]。根结线虫病作为一种土传病害，防治较为困难，加之多年连作、过量施用化肥、忽视虫源的控制治理，导致根结线虫病危害日益严重。因此，基于有害生物综合治理的理念，综合利用抗病品种、农业防治、物理防治、生物防治、化学防治等手段来降低根结线虫的群体数量，可减轻对农作物的危害和产量损失。此外，明确根结线虫致病的分子机制，对于开发设计新型的植物线虫防控策略具有重要意义。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标
通过酵母双杂技术、共定位、双分子荧光互补、免疫共沉淀方法验证南方根结线虫Mi-V75与番茄RNF14两个基因的互作，从而进一步阐明Mi-V75在线虫侵染过程中发挥的作用。
2.研究内容
3. 研究的方法与方案
1.研究方法、技术路线及实验方案
4. 研究创新点
本研究发现番茄的一种E3泛素连接酶RNF14可能与Mi-V75互作，试图利用酵母双杂技术、共定位、双分子荧光互补、免疫共沉淀等方法验证他们之间的互作，互作的关键结构域，以及在烟草细胞中互作的位点。深入解析Mi-V75基因与植物的互作机制，为线虫病害防治提供重要的指导依据。
5. 研究计划与进展
1.2018年7月-8月 构建Mi-V75与RNF14不同结构域的酵母载体和植物表达载体
2.2018年9月-10月 Y2H检测Mi-V75与RNF14互作的关键结构域
3.2018年10月-11月 共聚焦观察Mi-V75与RNF14在细胞中的定位
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